1、菌落总数的测定，一般将被检样品制成几个不同的10倍递增稀释液，然后从每个稀释液中分别取出1mL置于灭菌平皿中与营养琼脂培养基混合，在一定温度下，培养一定时间后（一般为48小时），记录每个平皿中形成的菌落数量，依据稀释倍数，计算出每克（或每ml）原始样品中所含细菌菌落总数。

2、在进行菌落计数时，有一些样品的残渣会在视觉上与菌落混淆，因此，在进行计数时应该仔细分辨。

3、菌落的形状相对规则，比较有光泽度，更饱满，而样品的残渣比较不规则，没有菌落的饱满度和光泽度。

(相关资料图)

4、另外，还可向培养基中添加一定浓度的TTC，可以使菌落成红色，便于观测和计数，但TTC的浓度不宜过高，否则会抑制菌落的生长。

5、从温箱内取出平皿进行菌落计数时，应先分别观察同一稀释度的两个平皿和不同稀释度的几个平皿内平板上菌落生长情况。

6、平行试验的2个平板与菌落数应该接近，不同稀释度的几个平板上菌落数则应与检样稀释倍数成反比，即检样稀释倍数越大，菌落数越低，稀释倍数越小，菌落数越高。

7、菌落计数所得结果，可分别按以下几种不同情况作报告。

8、 若1个稀释度的平均菌落数在30—300之间，则将该菌落数乘其稀释倍数报告之。

9、 若有两个稀释度，其生长的菌落数均在30—300之间，则视二者之比如何来决定。

10、若其比值小于2，应报告其平均数。

11、若所有稀释度的平均菌落数均大于300，则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。

12、 若所有稀释度的平均菌落数均小于30，则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。

13、扩展资料：计数和报告1．操作方法：培养到时间后，计数每个平板上的菌落数。

14、可用肉眼观察，必要时用放大镜检查，以防遗漏。

15、在记下各平板的菌落总数后，求出同稀释度的各平板平均菌落数，计算处原始样品中每克（或每ml）中的菌落数，进行报告。

16、2．到达规定培养时间，应立即计数。

17、如果不能立即计数，应将平板放置于0－4℃，但不得超过24h。

18、3．计数时应选取菌落数在30~300之间的平板（SN标准要求为25~250个菌落），若有二个稀释度均在30~300之间时，按国家标准方法要求应以二者比值决定，比值小于或等于2取平均数，比值大于2则其较小数字（有的规定不考虑其比值大小，均以平均数报告）。

19、4．若所有稀释度均不在计数区间。

20、如均大于300，则取最高稀释度的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。

21、如均小于30，则以最低稀释度的平均菌落数乘稀释倍数报告之。

22、如菌落数有的大于300，有的又小于30，但均不在30~300之间，则应以最接近300或30的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。

23、如所有稀释度均无菌落生长，则应按小于1乘以最低稀释倍数报告之。

24、有的规定对上述几种情况计算出的菌落数按估算值报告。

25、5．不同稀释度的菌落数应与稀释倍数成反比（同一稀释度的二个平板的菌落数应基本接近），即稀释倍数愈高菌落数愈少，稀释倍数愈低菌落数愈多。

26、如出现逆反现象，则应视为检验中的差错（有的食品有时可能出现逆反现象，如酸性饮料等），不应作为检样计数报告的依据。

27、6．当平板上有链状菌落生长时，如呈链状生长的菌落之间无任何明显界限，则应作为一个菌落计，如存在有几条不同来源的链，则每条链均应按一个菌落计算。

28、不要把链上生长的每一个菌落分开计数。

29、如有片状菌落生长，该平板一般不宜采用，如片状菌落不到平板一半，而另一半又分布均匀，则可以半个平板的菌落数乘2代表全平板的菌落数。

30、7．当计数平板内的菌落数过多（即所有稀释度均大于300时），但分布很均匀，可取平板的一半或1/4计数。

31、再乘以相应稀释倍数作为该平板的菌落数。

32、8．菌落数的报告，按国家标准方法规定菌落数在1~100时，按实有数字报告，如大于100时，则报告前面两位有效数字，第三位数按四舍五入计算。

33、固体检样以克（g)为单位报告，液体检样以毫升（ml）为单位报告，表面涂擦则以平方厘米（cm）报告。

34、参考资料：百度百科--菌落总数HiCC-Y增强型全自动菌落计数、抑菌圈测量（药敏效价分析）、舒巴坦敏感β-内酰胺酶检验仪1 成像装置· 超大变焦镜头的佳能EOS单反相机、1800万像素真彩CMOS (5184×3456)。

35、最高分辨率0.014mm，可分辨大于0.016mm的菌落（对90mm平皿=90mm /3456像素=0.026mm/像素；对50mm平皿=50mm /3456像素=0.014mm/像素）；· 光源：可实现均匀背光成像、悬浮式暗视野正面成像的上下双光源；· 具有9点自动聚焦、动静态图像并行观察、自动白平衡、自动色温控制。

36、系统内含扫描仪接口，还可以通过扫描仪成像分析；· 具有图象增强、色度调节、灰度负相变换，图像亮度、对比度、饱和度调整功能，调整值自动记忆保存。

37、具有视野导航、任意放大、缩小、局部观察功能；· 适应培养皿：50～140mm（倾注、涂布、膜滤、螺旋平皿、3M纸片）。

38、2 菌落计数分析· 自动识别统计：SmartdownTM菌落智能识别技术，自动识别大规模团状、链状粘连的长形杆菌（显微形态大片粘连的大肠杆菌、病菌孢子）及平皿上的各类菌落（含金色葡萄球菌计数（国标GB4789.37-2010）、大肠菌群测定（国标GB/T4789.3-2010））。

39、可自动形成批操作向导，实现一键式自动计数；· 自动计数精度≥96.5%，最多监视修正3.5%，即达100%正确。

40、分析统计速度：150～800个菌落/s ；· 菌落粘连分割：自动分割相互成片粘连的长形、圆形等菌落目标，用户可选择分割或不分割；· 颜色形状识别：可按20类分类识别计数特定颜色、形状的菌落数量，并可类别转换修正。

41、自动定位平皿的目标区，可自由增减或编辑分析目标区；· 菌落形态分析：自动获得各菌落面积、等效直径、长轴、短轴、长宽比、圆度、周长、形状系数等。

42、可按形态指标过滤查询。

43、· 鼠标点击修正、自动杂质剔除、符合GB 47892-2010的参数自动换算特性。

44、3 抑菌圈测量· “一键”式全自动测定平皿中的所有抑菌圈，可全自动测定局部粘连的抑菌圈，可在有局部文字干扰的情况下，自动获得抑菌圈面积、直径等结果。

45、测量分析耗时1～2秒钟，能统一保存或查看阅读相关各类分析数据；· 平皿可任意方向摆放。

46、具有抑菌圈样本自动挑选、保真的可视化比对、编辑功能。

47、抑菌圈测量系统的分辨率≤0.001mm、重复测量误差≤0.002mm；效价测量误差≤0.3%；效价重复测量误差≤0.3%；台间测量差异≤0.2% ；· 符合中国药典、USP美国药典、EP欧洲药典，可完成最新的国家药典(2010版)一、二、三剂量及合并计算，以及全部菌种的抗生素效价分析；· 可按食品添加剂 乳酸链球菌素QB 2394-2007标准，自动测量平皿上的所有抑菌圈并自动分析出效价；· 内置美国CLSI“抗微生物药物敏感性试验执行标准”最新第22版(2012)全部数据，提供数据输入和修改平台，方便更新，为纸片法药敏分析提供快捷工具。

48、4 舒巴坦敏感β-内酰胺酶检验 · 依据国家卫生部《乳及乳制品中舒巴坦敏感β-内酰胺酶类物质检验方法--杯碟法》，测量乳及乳制品中的舒巴坦敏感β-内酰胺酶（金玉兰酶）类物质。

49、可依据纯水对照中（A）、（B）、（D）管产生抑菌圈直径，同时自动判断6个平皿的各分析结果是否成立。

50、可根据样品中（A）、（B）管产生的抑菌圈直径，自动产生阳性或阴性的结果输出报告；· 具有无效报告自动预警功能，可依尺寸等的区别，自动剔除杂质或缺损异常，使报告更全面可靠。

51、可生成符合GLP/GMP要求的报告，遵循原始数据及记录的完整性，为实验室认证提供全面数据支持。

52、可任意调取历史数据，方便实验室的数字化文件管理。

53、5 数据导出与查询等· 分析图像与数据结果可保存，自动形成Excel或PDF文档报告，可统一保存或查看阅读相关各类分析数据和图像证据，并形成总报表。

54、尺寸自动标定及人工标定。

55、具有抑菌圈样本自动挑选、可视化比对、交互式精确测量、编辑功能。

56、最新Windows操作界面，简便易用，软件可自主在线升级。

57、6 系统配置· 带超大变焦镜佳能EOS单反相机的光学成像装置 1台；· 万深全自动菌落计数分析、抑菌圈测量、抗生素药敏效价分析、智能型β-内酰胺酶检测分析软件及锁 1套；· 联想B325R4一体机电脑（双核CPUz /2.0G内存/1GB独立显卡/硬盘500GB /DVD-RM/ 21.5”彩显/无线网卡、32位的Windows 7操作系统）1台。

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